Антинейтрофильные цитоплазматические антитела - Anti-neutrophil cytoplasmic antibody
Анти-нейтрофилов цитоплазматические антитела ( ANCAs ) представляют собой группу аутоантител , в основном из IgG типа, против антигенов в цитоплазме из нейтрофильных гранулоцитов (наиболее распространенный тип белых кровяных клеток ) и моноцитах . Они обнаруживаются в анализе крови при ряде аутоиммунных заболеваний , но особенно связаны с системным васкулитом , так называемыми ANCA-ассоциированными васкулитами (AAV).
Шаблоны ANCA IF
Иммунофлуоресценция (IF) на нейтрофилах, фиксированных этанолом, используется для обнаружения ANCA, хотя нейтрофилы, фиксированные в формалине, могут использоваться для помощи в дифференцировании паттернов ANCA. ANCA можно разделить на четыре шаблона при визуализации с помощью IF; цитоплазматический ANCA (c-ANCA), C-ANCA (атипичный), перинуклеарный ANCA (p-ANCA) и атипичный ANCA (a-ANCA), также известный как x-ANCA. c-ANCA демонстрирует цитоплазматическую гранулярную флуоресценцию с центральным межлобулярным усилением. C-ANCA (атипичный) показывает цитоплазматическое окрашивание, которое обычно однородно и не имеет межлобулярного акцентирования. p-ANCA имеет три подтипа: классический p-ANCA, p-ANCA без ядерного удлинения и антинуклеарное антитело, специфичное для гранулоцитов (GS-ANA). Классический p-ANCA показывает перинуклеарное окрашивание с ядерным удлинением, p-ANCA без ядерного удлинения имеет перинуклеарное окрашивание без ядерного удлинения, а GS-ANA показывает ядерное окрашивание только на гранулоцитах. a-ANCA часто показывает комбинации как цитоплазматического, так и перинуклеарного окрашивания.
Антигены ANCA
Антиген c-ANCA - это, в частности, протеиназа 3 (PR3). Антигены p-ANCA включают миелопероксидазу (MPO) и фактор увеличения бактериальной проницаемости. Бактерицидный белок / белок, увеличивающий проницаемость (BPI). Существуют и другие антигены c-ANCA (атипичные), однако многие из них пока неизвестны. Классический p-ANCA встречается с антителами, направленными на MPO. p-ANCA без удлинения ядра встречается с антителами к BPI, катепсину G , эластазе , лактоферрину и лизоциму . GS-ANA - это антитела, направленные к ядерным антигенам, специфичным для гранулоцитов. Считается, что атипичные ANCA являются антигенами, аналогичными антигенам p-ANCA, однако могут возникать из-за различий в процессинге нейтрофилов.
Другие менее общие антигены включают HMG1 (р-ANCA шаблон), HMG2 (р-ANCA шаблон), альфа - енолаз (р и с-ANCA рисунок), каталазы (р и с-ANCA шаблон), бета - глюкуронидазу (р-ANCA шаблон) , азуроцидин (p и c-ANCA), актин (p и a-ANCA) и h-lamp-2 (c-ANCA).
ELISA
Иммуноферментный анализ (ELISA) используется в диагностических лабораториях для обнаружения ANCA. Хотя IF можно использовать для скрининга многих ANCA, ELISA используется для обнаружения антител к отдельным антигенам. Наиболее распространенными антигенами, используемыми на микротитровальном планшете ELISA, являются MPO и PR3, которые обычно проверяются после положительного теста IF.
Разработка
Непонятно, как развиваются ANCA, хотя было высказано несколько гипотез. Вероятно, существует генетический вклад, особенно в генах, контролирующих уровень иммунного ответа - хотя генетическая восприимчивость, вероятно, связана с фактором окружающей среды, некоторыми возможными факторами, включая вакцинацию или воздействие силикатов. Постулируются два возможных механизма развития ANCA, хотя ни одна из этих теорий не отвечает на вопрос о том, как развиваются различные особенности ANCA, и по разработке ANCA все еще проводится много исследований.
Теория молекулярной мимикрии
Микробные суперантигены - это молекулы, экспрессируемые бактериями и другими микроорганизмами, которые обладают способностью стимулировать сильный иммунный ответ путем активации Т-клеток . Эти молекулы обычно имеют участки, похожие на аутоантигены, которые способствуют остаточному аутоиммунному ответу - это теория молекулярной мимикрии. Стафилококковые и стрептококковые суперантигенов были охарактеризованы при аутоиммунных заболеваниях - классический пример в пост стрептококками группы А ревматической болезни сердца , где имеется сходство между M белков из Streptococcus Пирролидонилпептидаза до сердечного миозина и ламинин . Также было показано, что до 70% пациентов с гранулематозом с полиангиитом являются хроническими носителями Staphylococcus aureus , у носителей риск рецидива увеличивается в восемь раз . Следовательно, это будет считаться реакцией гиперчувствительности II типа .
Теория дефектного апоптоза
Нейтрофильная Апоптоз , или запрограммированная гибель клеток, имеет жизненно важное значение для контроля продолжительности ранней воспалительной реакции, тем самым ограничивая повреждение тканей нейтрофилами. ANCA может развиваться либо путем неэффективного апоптоза, либо путем неэффективного удаления фрагментов апоптозных клеток, что приводит к воздействию на иммунную систему молекул, которые обычно изолированы внутри клеток. Эта теория разрешает парадокс того, как могут возникать антитела против внутриклеточных антигенных мишеней ANCA.
Роль в болезни
Ассоциации болезней
ANCA связаны с васкулитами мелких сосудов, включая гранулематоз с полиангиитом , микроскопический полиангиит , первичный малочисленный иммунно-некротический серповидный гломерулонефрит (тип микроскопического полиангиита с ограничением функции почек), эозинофильный гранулематоз с полиангиитом и лекарственными васкулитами. PR3-направленный c-ANCA присутствует в 80–90% случаев гранулематоза с полиангиитом, в 20–40% случаев микроскопического полиангиита, в 20–40% случаев слабоиммунного серповидного гломерулонефрита и в 35% случаев эозинофильного гранулематоза с полиангиитом. c-ANCA (атипичный) присутствует в 80% случаев муковисцидоза (с BPI в качестве антигена-мишени), а также при воспалительном заболевании кишечника , первичном склерозирующем холангите и ревматоидном артрите (с антителами к нескольким антигенным мишеням). p-ANCA со специфичностью к МПО обнаруживается в 50% случаев микроскопического полиангиита, в 50% случаев первичного паучиммунно-некротического серповидного гломерулонефрита и в 35% случаев эозинофильного гранулематоза с полиангиитом. p-ANCA со специфичностью к другим антигенам ассоциируется с воспалительным заболеванием кишечника, ревматоидным артритом, лекарственным васкулитом, аутоиммунным заболеванием печени , синдромами, индуцированными лекарствами, и паразитарными инфекциями. Атипичный ANCA связан с лекарственным системным васкулитом, воспалительным заболеванием кишечника и ревматоидным артритом. Уровень ANCA-положительных результатов намного выше у пациентов с сахарным диабетом 1 типа, чем у здоровых людей.
Левамизол , который часто является примесью кокаина , может вызывать ANCA-положительный васкулит.
Наличие или отсутствие ANCA не может указывать на наличие или отсутствие заболевания, и результаты коррелируют с клиническими признаками. Связь ANCA и активности болезни остается спорной; однако повторное появление ANCA после лечения может указывать на рецидив.
Патогенез
Хотя патогенная роль ANCA все еще остается спорной, модели in vitro и на животных подтверждают идею о том, что антитела имеют прямую патологическую роль в образовании васкулитов мелких сосудов. Специфичные для MPO и PR3 ANCA могут активировать нейтрофилы и моноциты через свои рецепторы Fc и Fab'2, которые могут усиливаться цитокинами, которые заставляют нейтрофилы отображать MPO и PR3 на своей поверхности. Аберрантное гликозилирование ANCA, специфичного для MPO и PR3, увеличивает их способность взаимодействовать с активирующими рецепторами Fc на нейтрофилах. Затем активированные нейтрофилы могут прикрепляться к эндотелиальным клеткам, где происходит дегрануляция. Это высвобождает свободные радикалы кислорода и литические ферменты, что приводит к повреждению эндотелия за счет индукции некроза и апоптоза . Кроме того, нейтрофилы выделяют хемоаттрактивные сигнальные молекулы, которые привлекают больше нейтрофилов к эндотелию, действуя как петля положительной обратной связи. Модели на животных показали, что антитела к МПО могут вызывать некротический серповидный гломерулонефрит и системный васкулит мелких сосудов. В этих моделях на животных образование гломерулонефрита и васкулита может происходить в отсутствие Т-клеток, однако нейтрофилы должны присутствовать. Несмотря на то, ANCA Титры были отмечены , чтобы иметь ограниченную корреляцию с активностью болезни, болезни почек , за исключением того , и с риском рецидива, это объясняется различиями в эпитопов и аффинности ANCAs. ANCA вызывают избыточную активацию нейтрофилов , что приводит к образованию внеклеточных ловушек нейтрофилов (NET), которые вызывают повреждение мелких кровеносных сосудов. Кроме того, у пациентов с активным заболеванием, получавших ритуксимаб , антитело к CD20, которое удаляет циркулирующие B-клетки, клиническая ремиссия больше коррелирует с уменьшением количества циркулирующих B-клеток, чем со снижением титра ANCA, который у некоторых пациентов не наблюдается. изменение во время лечения. В том же исследовании было обнаружено, что клинический рецидив у некоторых пациентов был связан с возвращением циркулирующих В-клеток. На основании вышеприведенных наблюдений и того, что ANCA-реактивные B-клетки могут быть обнаружены в кровотоке у пациентов с AAV, была предложена альтернативная гипотеза, приписывающая прямую патогенную роль этих клеток, в результате чего активированные нейтрофилы и ANCA-реактивные B-клетки участвуют в межклеточном взаимодействии. перекрестный разговор, который приводит не только к дегрануляции и воспалению нейтрофилов, но также к пролиферации и дифференцировке ANCA-реактивных B-клеток. Однако эту гипотезу еще предстоит проверить.
Уход
Авакопан был одобрен для медицинского применения в США для лечения васкулита, ассоциированного с антинейтрофильными цитоплазматическими аутоантителами, в октябре 2021 года.
История
ANCA были первоначально описаны в Davies et al. в 1982 г. при сегментарно-некротизирующем гломерулонефрите . Второй международный семинар ANCA, состоявшийся в Нидерландах в мае 1989 г., определил номенклатуру перинуклеарных и цитоплазматических паттернов, а антигены MPO и PR3 были обнаружены в 1988 и 1989 годах, соответственно. Международные семинары ANCA проводятся каждые два года.
использованная литература
внешние ссылки
- изображения pANCA и CANCA
- флуоресцентные изображения ANCA
- Anti-Neutrophil + Cytoplasmic + Antibody в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)