C2C12 - C2C12
C2C12 представляет собой иммортализованную линию миобластных клеток мыши . Клеточная линия C2C12 представляет собой субклон миобластов, которые были первоначально получены Яффе и Сакселом в Институте науки Вейцмана в Израиле в 1977 году. Клетки C2C12, разработанные для исследований in vitro миобластов, выделенных в результате сложных взаимодействий в условиях in vivo , полезны для биомедицинские исследования. Эти клетки способны к быстрой пролиферации в условиях высокой сыворотки и дифференцировке в мышечные трубки в условиях низкой сыворотки. Мононуклеарные миобласты могут позже слиться с образованием многоядерных миотрубок в условиях низкого уровня сыворотки или голодания, что приводит к предшественникам сократительных клеток скелетных мышц в процессе миогенеза . Клетки C2C12 используются для изучения дифференцировки миобластов, остеобластов и миогенеза, экспрессии различных белков-мишеней и изучения механистических биохимических путей.
Морфология
Клетки C2C12 дикого типа имеют морфологию радиального ветвления, состоящую из длинных волокон, идущих во многих направлениях. Клетки C2C12 можно культивировать в различных условиях, чтобы вызвать интересующие специфические ответы. Например, при помощи высокой скорости дифференцировки и скорости слияния клеточной линии матрицы фибронектина можно микропланшировать в чашки Петри или колбы для культивирования клеток, чтобы вызвать определенные паттерны роста, такие как взаимодействие клеток скелетных мышц с компонентами внеклеточного матрикса . Введение молекул адгезии может изменить характер роста клеток C2C12 до продольного распределения, проявляющего полярность. Есть много способов регулировать форму миобластов C2C12 генетически и экологически, от стресса до изменения цитоскелета и факторов роста. Каркас из клеток C2C12 особенно важен для изучения регенерации мышечной ткани после травмы или истощения ткани из-за болезни или реабилитации в интенсивной терапии .
Использование в исследованиях
Было показано, что клетки C2C12 эффективно включают экзогенную кДНК и нуклеиновые кислоты путем трансфекции . В пилотных исследованиях, первоначально проведенных Yaffe и Saxel, C2C12 были получены путем серийного пассажа миобластов, культивированных из мышцы бедра мышей C3H после раздавливания. В их исследовании набор клеток C2C12 культивировали от мышей, гомозиготных по гену dy . У этих мышей был синдром, подобный ранней мышечной дистрофии человека. Нормальные миобласты мышей культивировали от 2-месячных мышей C3H после травмы раздавливанием. В течение двух дней нормальные клетки дифференцировались в веретенообразные мононуклеарные миобласты. Через четыре дня сформировались многоядерные сети миотрубок, а через несколько дней можно было наблюдать саркомеры и Z-линии. Напротив, дистрофические клетки образовывали укороченные волокна, покрытые фибробластами , что является признаком мышечного истощения.
Клетки C2C12 демонстрируют быстрое развитие и созревание в функциональные клетки скелетных мышц или клетки сердечной мышцы , обладающие способностью сокращаться и генерировать силу. Скорость формирования мышц из клеток C2C12 можно контролировать путем введения генов потери функций, жизненно важных для слияния миобластов и миогенеза. В некротических условиях, таких как фактор некроза опухоли альфа ( TNF-α ), была показана прямая потеря белка, особенно белка тяжелой цепи миозина , в клетках скелетных мышц C2C12. Клетки C2C12 использовали для выяснения репликации инактивированной Х-хромосомы (Xi) во время ранней S-фазы клеточного цикла, которая регулируется эпигенетически. Клетки C2C12 особенно удобны для изучения клеточного цикла из-за высокой скорости деления.