Иммунофиксация - Immunofixation

Иммунофиксация позволяет обнаруживать и типировать моноклональные антитела или иммуноглобулины в сыворотке или моче . Это очень важно для диагностики и мониторинга некоторых заболеваний крови, таких как миелома .

Принцип

Метод обнаруживает преципитацию : когда растворимый антиген (Ag) вступает в контакт с соответствующим антителом , происходит преципитация, которую можно увидеть невооруженным глазом или под микроскопом.

Иммунофиксация определяет антитела в смеси в зависимости от их специфической электрофоретической подвижности. Для идентификации используются антигены, специфичные для целевого антитела.

В частности, иммунофиксация позволяет обнаруживать моноклональные антитела, характерные для таких заболеваний, как миелома или макроглобулинемия Вальденстрема .

Техника

Методика заключается в нанесении образца сыворотки (или предварительно сконцентрированной мочи) на гель. После подачи электрического тока, который позволяет разделить белки по размеру, на гель наносятся антитела, специфичные для каждого типа иммуноглобулина . Таким образом, на геле появляются более или менее узкие полосы, относящиеся к разным иммуноглобулинам.

Иммунофиксация, как иммуноэлектрофорез, проходит в два этапа:

  • Первый шаг идентичен для обоих методов. Он заключается в осаждении иммуноглобулинов, содержащихся в сыворотке или моче, на геле с последующим разделением иммуноглобулинов в соответствии с их электрофоретической подвижностью, заставляя их мигрировать под действием электрического поля. Эта миграция зависит от массы и заряда антигена. После разделения иммуноглобулинов мы можем перейти к следующему шагу.
  • Второй шаг основан на используемой технике. Иммунофиксация требует электрофореза для миграции белков сыворотки в репликации. Затем для обработки каждой повторности используют специфические антисыворотки против иммуноглобулинов. Для этого антисыворотки не помещают в канал, как при электрофорезе, а добавляют индивидуально к каждой полосе миграции. Наличие моноклонального иммуноглобулина приводит к появлению узкой полосы после осаждения окрашивающего комплекса. Например, в случае лямбда IgG будет узкая полоса как на дорожке, на которой был отложен анти-G, так и на треке, на котором был отложен анти-лямбда.

Заслуги

Иммунофиксация заменяет электрофорез белков, потому что:

  • быстрее (результат в течение трех часов);
  • он несколько более чувствительный. Иммунофиксация может выявить иммуноглобулин, пропущенный электрофорезом белков, особенно при низких концентрациях (менее 1 грамма / литр);
  • его можно частично автоматизировать и использовать в большем количестве лабораторий;
  • его легче читать и интерпретировать.

Недостатки

Однако иммунофиксация чувствительна только к иммуноглобулинам и стоит дороже, чем электрофорез белков.

Смотрите также

Источники

внешние ссылки