Витамин В 12 -Vitamin B12

Витамин В 12
(данные для цианокобаламина)
Кобаламин скелет.svg
Скелетная формула универсального кобаламина
Цианокобаламин-из-xtal-3D-st-noH.png
Стик - модель цианокобаламина (R = CN) на основе кристаллической структуры
Клинические данные
Другие имена Витамин B12, витамин B-12, кобаламин
AHFS / Drugs.com Монография
МедлайнПлюс а605007
Данные лицензии
Пути
введения
Внутрь , сублингвально, внутривенно (в/в), внутримышечно (в/м), интраназально
Код УВД
Легальное положение
Легальное положение
Фармакокинетические данные
Биодоступность Легко всасывается в дистальной половине подвздошной кишки.
Связывание с белками Очень высокая концентрация специфических транскобаламинов в белках плазмы.
Связывание гидроксокобаламина несколько выше, чем у цианокобаламина.
Метаболизм печень
Период полувыведения Примерно 6 дней
(400 дней в печени).
Экскреция почка
Идентификаторы
  • α-(5,6-диметилбензимидазолил)кобамидцианид
Количество CAS
PubChem CID
НаркоБанк
ХимПаук
УНИИ
КЕГГ
ЧЭМБЛ
Химические и физические данные
Формула С 63 Н 88 Со N 14 О 14 Р
Молярная масса 1 355 ,388  г·моль −1
3D модель ( JSmol )
  • NC(=O)C[C@@]8(C)[C@H](CCC(N)=O)C=2/N=C8/C(/C)=C1/[C@@H] (CCC(N)=O)[C@](C)(CC(N)=O)[C@@](C)(N1[Co+]C#N)[C@@H]7/N= C(C(\C)=C3/N=C(/C=2)C(C)(C)[C@@H]3CCC(N)=O)[C@](C)(CCC(= O)NCC(C)OP([O-])(=O)O[C@@H]6[C@@H](CO)O[C@H](n5cnc4cc(C)c(C)cc45 )[C@@H]6O)[C@H]7CC(N)=O
  • InChI=1S/C62H90N13O14P.CN.Co/c1-29-20-39-40(21-30(29)2)75(28-70-39)57-52(84)53(41(27-76) 87-57)89-90(85,86)88-31(3)26-69-49(83)18-19-59(8)37(22-46(66)80)56-62(11) 61(10,25-48(68)82)36(14-17-45(65)79)51(74-62)33(5)55-60(9,24-47(67)81)34( 12-15-43(63)77)38(71-55)23-42-58(6,7)35(13-16-44(64)78)50(72-42)32(4)54( 59)73–56;1–2;/ч20-21,23,28,31,34-37,41,52-53,56-57,76,84Н,12-19,22,24-27Н2,1 -11H3,(H15,63,64,65,66,67,68,69,71,72,73,74,77,78,79,80,81,82,83,85,86);;/q ;;+2/p-2/t31?,34-,35-,36-,37+,41-,52-,53-,56-,57+,59-,60+,61+,62+ ;;/м1../с1 чек об оплатеД
  • Ключ:RMRCNWBMXRMIRW-WYVZQNDMSA-L чек об оплатеД

Витамин B12 , также известный как кобаламин , является водорастворимым витамином , участвующим в обмене веществ . Это один из восьми витаминов группы В. Он необходим животным, которые используют его в качестве кофактора в синтезе ДНК , как в метаболизме жирных кислот , так и в метаболизме аминокислот . Он важен для нормального функционирования нервной системы благодаря его роли в синтезе миелина и созревании эритроцитов в костном мозге . Растения не нуждаются в кобаламине и осуществляют реакции с ферментами, от него не зависящими.

Витамин B 12 является наиболее химически сложным из всех витаминов, и для человека это единственный витамин, который должен быть получен из продуктов животного происхождения. Только некоторые археи и бактерии могут синтезировать витамин B 12 . Большинство людей в развитых странах получают достаточно B 12 из мяса или продуктов животного происхождения. Витамин B 12 доступен в виде добавки и для лечения дефицита в виде внутримышечной инъекции .

Наиболее распространенной причиной дефицита витамина B 12 в развитых странах является нарушение всасывания из-за потери желудочного внутреннего фактора (IF), который должен быть связан с пищевым источником B 12 для того, чтобы произошло всасывание. Второй важной причиной является возрастное снижение выработки желудочной кислоты ( ахлоргидрия ), поскольку воздействие кислоты высвобождает витамин, связанный с белком. По той же причине люди, длительно принимающие антациды, применяющие ингибиторы протонной помпы , Н2-блокаторы или другие антациды, подвергаются повышенному риску. Диеты вегетарианцев и веганов могут не обеспечивать достаточного количества B 12 , если только не потребляются пищевые добавки. Дефицит витамина B 12 может характеризоваться невропатией конечностей или заболеванием крови, называемым пернициозной анемией , разновидностью мегалобластной анемии , вызывающей чувство усталости и слабости, головокружение, головную боль, одышку, потерю аппетита, ощущение покалывания , изменения в подвижности , сильные боли в суставах , мышечная слабость, проблемы с памятью, снижение уровня сознания , туман в голове и многие другие. Уровни фолиевой кислоты у человека могут влиять на течение патологических изменений и симптоматику дефицита витамина B 12 .

Витамин B 12 был обнаружен в результате пернициозной анемии , аутоиммунного заболевания, при котором в крови содержится меньшее, чем обычно, количество эритроцитов из-за дефицита витамина B 12 . Способность усваивать витамин снижается с возрастом, особенно у людей старше 60 лет.

Определение

Витамин B 12 представляет собой координационный комплекс кобальта, который занимает центр корринового лиганда и дополнительно связан с бензимидазольным лигандом и аденозильной группой. Это темно-красное твердое вещество, которое растворяется в воде с образованием красных растворов.

Известен ряд родственных видов, и они ведут себя одинаково, в частности, все они функционируют как витамины. Этот набор соединений, одним из членов которого является витамин B 12 , часто называют «кобаламинами». Эти химические соединения имеют схожую молекулярную структуру, каждое из которых проявляет витаминную активность в витаминодефицитной биологической системе, их называют витамерами . Витамин действует как кофермент , а это означает, что его присутствие необходимо для некоторых реакций, катализируемых ферментами.

Цианокобаламин представляет собой промышленную форму B 12 . Бактериальная ферментация создает AdoB 12 и MeB 12 , которые превращаются в цианокобаламин при добавлении цианида калия в присутствии нитрита натрия и тепла. После потребления цианокобаламин превращается в биологически активные AdoB 12 и MeB 12 . Две биоактивные формы витамина B
12
метилкобаламин в цитозоле и аденозилкобаламин в митохондриях . _

Цианокобаламин является наиболее распространенной формой, используемой в пищевых добавках и пищевых добавках , поскольку цианид стабилизирует молекулу от деградации. Метилкобаламин также предлагается в качестве пищевой добавки. Нет никаких преимуществ в использовании аденозилкобаламина или метилкобаламина для лечения дефицита витамина B 12 .

Гидроксокобаламин можно вводить внутримышечно для лечения дефицита витамина B12 . Его также можно вводить внутривенно с целью лечения отравления цианидом, поскольку гидроксильная группа замещается цианидом, образуя нетоксичный цианокобаламин, который выделяется с мочой.

«Псевдовитамин B 12 » относится к соединениям, которые представляют собой корриноиды со структурой, подобной витамину, но без витаминной активности. Псевдовитамин B 12 является основным корриноидом в спирулине , пище для здоровья водорослей, иногда ошибочно заявляемой как обладающей этой витаминной активностью.

Дефицит

Дефицит витамина B 12 потенциально может вызвать серьезное и необратимое повреждение, особенно головного мозга и нервной системы. На уровнях чуть ниже нормы появляется ряд симптомов, таких как чувство усталости и слабости , ощущение, что человек может потерять сознание , затруднения при ходьбе (поразительные проблемы с равновесием), депрессия , плохая память , плохие рефлексы, спутанность сознания, одышка, головные боли и бледность кожи. , ненормальные ощущения , среди прочего, могут возникать, особенно у людей старше 60 лет. Дефицит витамина B 12 также может вызывать симптомы мании и психоза . Среди прочих проблем может возникнуть ослабленный иммунитет, снижение фертильности и нарушение кровообращения у женщин.

Основным типом анемии, вызванной дефицитом витамина В12, является пернициозная анемия . Характеризуется триадой симптомов :

  1. Анемия с промегалобластозом костного мозга ( мегалобластная анемия ). Это связано с ингибированием синтеза ДНК (особенно пуринов и тимидина ).
  2. Желудочно-кишечные симптомы: нарушение перистальтики кишечника, например легкая диарея или запор , и потеря контроля над мочевым пузырем или кишечником. Считается, что это происходит из-за дефектного синтеза ДНК, ингибирующего репликацию в участках ткани с высоким оборотом клеток. Это также может быть связано с аутоиммунной атакой на париетальные клетки желудка при пернициозной анемии. Существует связь с сосудистой эктазией антрального отдела желудка (которую можно назвать арбузным желудком) и пернициозной анемией.
  3. Неврологические симптомы: нарушения чувствительности или моторики (отсутствие рефлексов, ослабление вибрации или мягкого прикосновения) и подострая комбинированная дегенерация спинного мозга . Симптомы дефицита у детей включают задержку развития , регрессию , раздражительность , непроизвольные движения и гипотонию .

Дефицит витамина B 12 чаще всего вызывается нарушением всасывания, но также может быть следствием низкого потребления, иммунного гастрита, низкого содержания связывающих белков или использования определенных лекарств. Веганы — люди, которые решили не употреблять продукты животного происхождения, — находятся в группе риска, потому что продукты растительного происхождения не содержат витамина в достаточном количестве, чтобы предотвратить дефицит витамина. Вегетарианцы — люди, которые потребляют побочные продукты животного происхождения, такие как молочные продукты и яйца, но не мясо любого животного, — также подвержены риску. Дефицит витамина B 12 наблюдается у 40–80 % вегетарианцев, которые также не принимают пищевые добавки с витамином B 12 и не употребляют продукты, обогащенные витаминами. В Гонконге и Индии дефицит витамина B 12 был обнаружен примерно у 80% веганов. Как и в случае с вегетарианцами, веганы могут избежать этого, употребляя пищевые добавки или продукты, обогащенные B 12 , такие как злаки, растительное молоко и пищевые дрожжи , в качестве регулярной части своего рациона. Пожилые люди подвергаются повышенному риску, потому что с возрастом у них вырабатывается меньше желудочной кислоты , состояние, известное как ахлоргидрия , тем самым увеличивая вероятность дефицита B 12 из-за снижения абсорбции.

Беременность, лактация и ранний детский возраст

Рекомендуемая диетическая норма США (RDA) для беременных составляет 2,6 мкг/день, для кормления грудью 2,8 мкг/день. Определение этих значений было основано на RDA 2,4 мкг/день для небеременных женщин плюс то, что будет передано плоду во время беременности, и то, что будет доставлено с грудным молоком. Однако, глядя на те же научные данные, Европейское управление по безопасности пищевых продуктов (EFSA) устанавливает адекватное потребление (AI) на уровне 4,5  мкг/день для беременных и 5,0 мкг/день для кормления грудью. Низкий уровень витамина B 12 у матери , определяемый как концентрация в сыворотке менее 148 пмоль/л, увеличивает риск выкидыша, преждевременных родов и низкой массы тела новорожденного при рождении. Во время беременности плацента концентрирует B 12 , поэтому у новорожденных концентрация в сыворотке крови выше, чем у их матерей. Так как именно недавно всосавшееся витаминное содержание более эффективно достигает плаценты, витамин, потребляемый будущей матерью, более важен, чем витамин, содержащийся в ткани ее печени. Женщины, которые потребляют мало продуктов животного происхождения, а также являются вегетарианцами или веганами, подвержены более высокому риску дефицита витаминов во время беременности, чем те, кто потребляет больше продуктов животного происхождения. Это истощение может привести к анемии, а также к повышенному риску дефицита витаминов у детей, находящихся на грудном вскармливании.

Низкие концентрации витаминов в грудном молоке наблюдаются в семьях с низким социально-экономическим статусом или низким потреблением продуктов животного происхождения. Только в нескольких странах, в основном в Африке, существуют обязательные программы обогащения пищевых продуктов либо пшеничной, либо кукурузной мукой; В Индии действует программа добровольного обогащения. То, что потребляет кормящая мать, важнее, чем содержание ткани ее печени, так как именно недавно усвоившийся витамин эффективнее попадает в грудное молоко. Количество B 12 в грудном молоке уменьшается в течение нескольких месяцев кормления грудью как у хорошо питающихся матерей, так и у матерей с дефицитом витаминов. Исключительно или почти исключительно грудное вскармливание после шести месяцев является убедительным показателем низкого уровня витаминов в сыворотке крови у грудных детей. Это особенно верно, когда витаминный статус был плохим во время беременности, и если пища, введенная в рацион ребенка на грудном вскармливании, является веганской. Риск дефицита сохраняется, если рацион питания после отъема содержит мало продуктов животного происхождения. Признаки низкого уровня витаминов у младенцев и детей младшего возраста могут включать анемию, плохой физический рост и задержку развития нервной системы. Детей, у которых диагностирован низкий уровень B 12 в сыворотке , можно лечить внутримышечными инъекциями, а затем переводить на пероральные пищевые добавки.

Шунтирование желудка

Для лечения морбидного ожирения используются различные методы обходного желудочного анастомоза или операции по ограничению желудка. Шунтирование желудка по Ру (RYGB), но не рукавное шунтирование желудка или бандажирование желудка, повышает риск дефицита витамина B 12 и требует профилактического послеоперационного лечения с помощью инъекций или высоких доз пероральных добавок. Для послеоперационного перорального приема может потребоваться 1000 мкг/день для предотвращения дефицита витаминов.

Диагноз

Согласно одному обзору: «В настоящее время не существует теста «золотого стандарта» для диагностики дефицита витамина B12, и, как следствие, диагностика требует учета как клинического состояния пациента, так и результатов исследований». Дефицит витаминов обычно подозревается, когда обычный общий анализ крови показывает анемию с повышенным средним корпускулярным объемом (MCV). Кроме того, в мазке периферической крови могут быть видны макроциты и гиперсегментированные полиморфноядерные лейкоциты . Диагноз подтверждается на основании уровня витамина B 12 в крови ниже 120–180 пмоль/л (170–250 пг/мл ) у взрослых. Однако значения в сыворотке могут поддерживаться, пока запасы В 12 в тканях истощаются. Следовательно, значения B 12 в сыворотке выше точки отсечения дефицита не обязательно подтверждают адекватный статус B 12 . По этой причине повышенный уровень гомоцистеина в сыворотке выше 15 мкмоль/л и метилмалоновой кислоты (ММА) выше 0,271 мкмоль/л считаются лучшими показателями дефицита B 12 , а не полагаются только на концентрацию B 12 в крови. Однако повышенный уровень ММА не является окончательным, поскольку он наблюдается у людей с дефицитом B 12 , а также у пожилых людей с почечной недостаточностью, а повышенный уровень гомоцистеина не является окончательным, поскольку он также наблюдается у людей с дефицитом фолиевой кислоты. Если имеется повреждение нервной системы и результаты анализа крови неубедительны, может быть проведена люмбальная пункция для измерения уровня цереброспинальной жидкости B 12 .

Медицинское использование

Раствор витамина В 12 (гидроксокобаламин) в многодозовом флаконе, при этом разовая доза набирается в шприц для инъекций. Препараты обычно ярко-красного цвета.

Восполнение дефицита

Тяжелый дефицит витамина B 12 корректируется частыми внутримышечными инъекциями больших доз витамина с последующими поддерживающими дозами инъекций или пероральным приемом с более длительными интервалами. В Великобритании стандартная начальная терапия состоит из внутримышечных инъекций 1000 мкг гидроксокобаламина три раза в неделю в течение двух недель или до улучшения неврологических симптомов, а затем по 1000 мкг каждые два или три месяца. Побочные эффекты инъекций включают кожную сыпь, зуд, озноб, лихорадку, приливы, тошноту и головокружение.

Отравление цианидом

При отравлении цианидами можно вводить внутривенно большое количество гидроксокобаламина, а иногда и в сочетании с тиосульфатом натрия . Механизм действия прост: гидроксид- лиганд гидроксикобаламина замещается токсичным ионом цианида, и образующийся нетоксичный цианокобаламин выводится с мочой .

Диетические рекомендации

Большинство людей в Соединенных Штатах и ​​Соединенном Королевстве потребляют достаточное количество витамина B 12 . Однако доля людей с низким или предельным уровнем витамина B 12 достигает до 40% в западном мире . Продукты на основе зерна можно обогащать , добавляя в них витамины. Добавки витамина B 12 доступны в виде отдельных или поливитаминных таблеток. Фармацевтические препараты витамина B 12 можно вводить внутримышечно . Поскольку неживотных источников витамина немного, веганам рекомендуется употреблять пищевые добавки или обогащенные продукты для приема B 12 , иначе они рискуют получить серьезные последствия для здоровья. Дети в некоторых регионах развивающихся стран подвергаются особому риску из-за повышенных потребностей во время роста в сочетании с диетами с низким содержанием продуктов животного происхождения.

Национальная медицинская академия США обновила оценочные средние потребности (EAR) и рекомендуемые диетические нормы (RDA) витамина B 12 в 1998 году. EAR витамина B 12 для женщин и мужчин в возрасте 14 лет и старше составляет 2,0  мкг/день; RDA составляет 2,4  мкг/день. RDA выше, чем EAR, чтобы определить суммы, которые покроют людей с потребностями выше среднего. RDA для беременных составляет 2,6  мкг/сутки. РСН в период лактации составляет 2,8 мкг/сутки. Для детей до 12 месяцев адекватное потребление (AI) составляет 0,4-0,5  мкг/день. (AI устанавливаются, когда недостаточно информации для определения EAR и RDA.) Для детей в возрасте 1–13 лет RDA увеличивается с возрастом с 0,9 до 1,8  мкг/день. Поскольку от 10 до 30 процентов пожилых людей могут быть неспособны эффективно усваивать витамин B 12 , встречающийся в природе в пищевых продуктах, лицам старше 50 лет рекомендуется соблюдать рекомендуемую суточную норму потребления, главным образом, потребляя продукты, обогащенные витамином B 12 , или добавки, содержащие витамин B. 12 . Что касается безопасности, допустимые верхние уровни потребления (известные как ULs) устанавливаются для витаминов и минералов, когда доказательств достаточно. В случае витамина B 12 нет UL, так как нет данных о побочных эффектах высоких доз у людей. В совокупности EAR, RDA, AI и UL называются эталонным потреблением с пищей (DRI).

Европейское управление по безопасности пищевых продуктов (EFSA) называет совокупный набор информации «референтными значениями диеты» с эталонным потреблением для населения (PRI) вместо RDA и средними потребностями вместо EAR. AI и UL определяются EFSA так же, как и в США. Для женщин и мужчин старше 18 лет адекватное потребление (AI) установлено на уровне 4,0  мкг/день. ИА при беременности составляет 4,5 мкг/сут, при лактации 5,0  мкг/сут. Для детей в возрасте 1–17 лет ИА увеличиваются с возрастом с 1,5 до 3,5  мкг/сут. Эти AI выше, чем RDA США. EFSA также рассмотрело вопрос безопасности и пришло к тому же выводу, что и в Соединенных Штатах, — что не было достаточных доказательств для установления UL для витамина B 12 .

Японский национальный институт здоровья и питания установил RDA для людей в возрасте 12 лет и старше на уровне 2,4  мкг/день. Всемирная организация здравоохранения также использует 2,4  мкг / день в качестве рекомендуемой нормы потребления этого витамина для взрослых.

Для целей маркировки пищевых продуктов и пищевых добавок в США количество в порции выражается как «процент от дневной нормы» (% DV). Для целей маркировки витамина B 12 100% дневной нормы составляло 6,0  мкг, но 27 мая 2016 г. она была снижена до 2,4  мкг. Соблюдение обновленных правил маркировки требовалось к 1 января 2020 года для производителей с годовым объемом продаж продуктов питания 10 миллионов долларов США и более и к 1 января 2021 года для производителей с меньшими объемами продаж продуктов питания. Таблица старых и новых суточных значений для взрослых представлена ​​в разделе « Справочное суточное потребление» .

Источники

Бактерии и археи

Витамин B 12 вырабатывается в природе некоторыми бактериями и археями . Он синтезируется некоторыми бактериями в кишечной микробиоте человека и других животных, но долгое время считалось, что люди не могут усваивать его, поскольку он производится в толстой кишке ниже по течению от тонкой кишки , где происходит поглощение большинства питательных веществ. Жвачные животные , такие как коровы и овцы, являются ферментерами передней кишки, а это означает, что растительная пища подвергается микробной ферментации в рубце , прежде чем попасть в настоящий желудок ( сычуг ), и, таким образом, они поглощают витамин B 12 , вырабатываемый бактериями. Другие виды млекопитающих (например , кролики , пищухи , бобры , морские свинки ) потребляют растения с высоким содержанием клетчатки, которые проходят через кишечную систему и подвергаются бактериальной ферментации в слепой кишке и толстой кишке . Первый пассаж фекалий, произведенный этой ферментацией в задней кишке , называемый « цекотропами », повторно проглатывается, что называется цекотрофией или копрофагией . Повторный прием внутрь позволяет поглощать питательные вещества, полученные в результате бактериального пищеварения, а также витамины и другие питательные вещества, синтезируемые кишечными бактериями, включая витамин B 12 . Нежвачные травоядные животные, не относящиеся к задней кишке, могут иметь увеличенный преджелудок и/или тонкую кишку, чтобы обеспечить место для бактериальной ферментации и производства витаминов группы В, включая В12 . Чтобы кишечные бактерии производили витамин B 12 , животное должно потреблять достаточное количество кобальта . Почва с дефицитом кобальта может привести к дефициту B 12 , и для домашнего скота могут потребоваться инъекции B 12 или добавки кобальта.

Продукты животного происхождения

Животные накапливают витамин B 12 из своего рациона в печени и мышцах , а некоторые выделяют этот витамин в яйца и молоко . Таким образом, мясо, печень, яйца и молоко являются источниками витамина для других животных, включая человека. Для человека биодоступность яиц составляет менее 9 % по сравнению с 40–60 % рыбы, птицы и мяса. Насекомые являются источником B 12 для животных (включая других насекомых и человека). Источники пищи животного происхождения с высокой концентрацией витамина B 12 включают печень и другие мясные субпродукты баранины , телятины , говядины и индейки ; моллюски и крабовое мясо .

Растения и водоросли

Натуральные растительные и водорослевые источники витамина B 12 включают ферментированные растительные продукты, такие как темпе , и продукты, полученные из морских водорослей, такие как нори и водоросли . Другие виды водорослей богаты B12 , а некоторые виды, такие как Porphyra yezoensis , содержат столько же кобаламина , сколько и печень . Метилкобаламин был обнаружен в Chlorella vulgaris . Поскольку только бактерии и некоторые археи обладают генами и ферментами, необходимыми для синтеза витамина B 12 , все источники растений и водорослей получают витамин вторично в результате симбиоза с различными видами бактерий или, в случае ферментированных растительных продуктов, в результате бактериальной ферментации.

Академия питания и диетологии считает источники растений и водорослей «ненадежными», заявляя, что веганы должны вместо этого обращаться к обогащенным продуктам и добавкам.

Обогащенные продукты

Продукты, обогащенные витамином B12 , включают сухие завтраки , заменители молока растительного происхождения , такие как соевое молоко и овсяное молоко , энергетические батончики и пищевые дрожжи . Обогащающим компонентом является цианокобаламин. Микробная ферментация дает аденозилкобаламин, который затем превращается в цианокобаламин путем добавления цианида калия или тиоцианата в присутствии нитрита натрия и нагревания.

По состоянию на 2019 год девятнадцать стран требуют обогащения пищевых продуктов пшеничной муки, кукурузной муки или риса витамином B 12 . Большинство из них находятся в юго-восточной Африке или Центральной Америке.

Веганские организации по защите интересов, среди прочего, рекомендуют каждому вегану потреблять B 12 либо из обогащенных продуктов, либо из пищевых добавок.

Дополнения

Блистерная упаковка таблеток метилкобаламина по 500 мкг.

Витамин В 12 входит в состав поливитаминных таблеток; в некоторых странах продукты на основе зерна, такие как хлеб и макаронные изделия, обогащаются витамином B 12 . В США можно приобрести безрецептурные продукты, содержащие до 5000  мкг каждый, и он является обычным ингредиентом энергетических напитков и энергетических доз , обычно во много раз превышающих рекомендуемую диетическую норму B 12 . Витамин также может быть рецептурным продуктом в виде инъекций или других средств.

Метилкобаламин для сублингвального применения , не содержащий цианида , выпускается в  таблетках по 5 мг. Ожидается, что метаболическая судьба и биологическое распределение метилкобаламина будут такими же, как и у других источников витамина B 12 в рационе. Количество цианида в цианокобаламине, как правило, не вызывает беспокойства, даже в  дозе 1000 мкг, так как количество цианида там (20  мкг в таблетке 1000  мкг цианокобаламина) меньше, чем суточное потребление цианида с пищей, и поэтому цианокобаламин не считается риском для здоровья. Людям, страдающим заболеваниями почек, не следует принимать большие дозы цианокобаламина из-за их неспособности эффективно метаболизировать цианид.

Внутримышечная или внутривенная инъекция

Инъекции гидроксикобаламина часто используются при нарушении пищеварительного всасывания, но этот курс действий может не потребоваться при пероральных добавках с высокими дозами (например, 0,5–1,0  мг или более), потому что при пероральном приеме больших количеств витамина даже От 1% до 5% свободного кристаллического B 12 , который всасывается по всему кишечнику путем пассивной диффузии, может быть достаточным для обеспечения необходимого количества.

Человеку с болезнью кобаламина С (которая приводит к комбинированной метилмалоновой ацидурии и гомоцистинурии ) может потребоваться лечение внутривенным или внутримышечным введением гидроксокобаламина или трансдермальным введением B 12 , поскольку пероральный цианокобаламин не подходит для лечения болезни кобаламина С.

Нанотехнологии, используемые в добавках витамина B12

Обычное введение не обеспечивает специфического распределения и контролируемого высвобождения витамина B 12 . Кроме того, терапевтические протоколы, включающие инъекции, требуют медицинского персонала и поездок пациентов в больницу, что увеличивает стоимость лечения и ухудшает образ жизни пациентов. Адресная доставка витамина B 12 является основным направлением современных рецептов. Например, доставка витамина в костный мозг и нервные клетки поможет восстановить миелин. В настоящее время разрабатываются несколько стратегий использования наноносителей для улучшения доставки витамина B 12 с целью упрощения введения, снижения затрат, улучшения фармакокинетики и улучшения качества жизни пациентов.

Псевдовитамин-В 12

Псевдовитамин-В 12 относится к В 12 -подобным аналогам, биологически неактивным в организме человека. Было обнаружено, что большинство цианобактерий, включая спирулину , и некоторые водоросли, такие как Porphyra tenera (используемые для приготовления пищи из сушеных морских водорослей, называемой в Японии нори ), содержат в основном псевдовитамин-B 12 вместо биологически активного B 12 . Эти псевдовитаминные соединения можно найти в некоторых видах моллюсков, съедобных насекомых и иногда в виде продуктов распада цианокобаламина, добавляемых в пищевые добавки и обогащенные продукты.

Псевдовитамин-В 12 может проявляться как биологически активный витамин В 12 при микробиологическом анализе с Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, так как бактерии могут использовать псевдовитамин, несмотря на то, что он недоступен для человека. Чтобы получить надежное чтение содержимого B 12 , доступны более продвинутые методы. Один из таких методов включает предварительное разделение на силикагеле и последующую оценку с помощью B 12 -зависимых бактерий E.coli .

Родственным понятием является антивитамин B 12 , соединения (часто аналоги B 12 ), которые не только не обладают витаминным действием, но и активно препятствуют активности истинного витамина B 12 . Систематический дизайн этих соединений был недавно выяснен в 2010-х годах. Эти соединения могут быть использованы для анализа путей утилизации B 12 или даже для атаки на B 12 -зависимые патогены.

Лекарственные взаимодействия

Антагонисты Н2 -рецепторов и ингибиторы протонной помпы

Желудочная кислота необходима для высвобождения витамина B 12 из белка для всасывания. Уменьшение секреции желудочной кислоты и пепсина в результате применения блокаторов H 2 или ингибиторов протонной помпы (ИПП) может снизить всасывание связанного с белком (диетического) витамина B 12 , хотя и не дополнительного витамина B 12 . Примеры антагонистов Н2 - рецепторов включают циметидин , фамотидин , низатидин и ранитидин . Примеры ИПП включают омепразол , лансопразол , рабепразол , пантопразол и эзомепразол . Клинически значимый дефицит витамина B 12 и мегалобластная анемия маловероятны, если только эти медикаментозные методы лечения не продлеваются на два или более лет или если, кроме того, рацион питания человека ниже рекомендуемого уровня. Симптоматическая авитаминоз более вероятен, если у человека наблюдается ахлоргидрия (полное отсутствие секреции желудочного сока), что чаще происходит при применении ингибиторов протонной помпы, чем Н2- блокаторов .

Метформин

Снижение уровня витамина B 12 в сыворотке наблюдается у 30% людей, длительно принимающих противодиабетический метформин . Дефицит не развивается, если потребление витамина B 12 с пищей является адекватным или если дается профилактическая добавка B 12 . Если обнаружен дефицит, прием метформина можно продолжить, пока дефицит корректируется добавками B 12 .

Другие препараты

Некоторые лекарства могут снижать всасывание перорально потребляемого витамина B 12 , в том числе: колхицин , препараты калия с пролонгированным высвобождением и антибиотики, такие как гентамицин , неомицин и тобрамицин . Противосудорожные препараты фенобарбитал , прегабалин , примидон и топирамат связаны с более низкой, чем обычно, концентрацией витаминов в сыворотке крови. Однако уровни в сыворотке были выше у людей, которым назначали вальпроат . Кроме того, некоторые лекарства могут мешать лабораторным тестам на витамин, например, амоксициллин , эритромицин , метотрексат и пириметамин .

Химия

Метилкобаламин (показан) представляет собой форму витамина B 12 . Физически он напоминает другие формы витамина B 12 , образуя темно-красные кристаллы, свободно образующие прозрачные растворы вишневого цвета в воде.

Витамин B 12 является наиболее химически сложным из всех витаминов. Структура B 12 основана на корриновом кольце, подобном порфириновому кольцу гема . Центральным ионом металла является кобальт . Выделенный в виде стабильного на воздухе твердого вещества и коммерчески доступный кобальт в витамине B 12 (цианокобаламин и другие витамеры) присутствует в степени окисления +3. Биохимически кобальтовый центр может принимать участие как в двухэлектронных, так и в одноэлектронных восстановительных процессах для получения доступа к «восстановленной» (B 12r , степень окисления +2) и «сверхвосстановленной» (B 12s , степень окисления +1) формам. . Способность переключаться между степенями окисления +1, +2 и +3 отвечает за универсальный химический состав витамина B 12 , позволяя ему служить донором дезоксиаденозильного радикала (источник алкильного радикала) и эквивалентом метилового катиона ( электрофильный алкильный источник). Четыре из шести координационных центров обеспечены корриновым кольцом, а пятый - диметилбензимидазольной группой. Шестой координационный центр, реактивный центр , может быть цианогруппой (-CN), гидроксильной группой (-OH), метильной группой (-CH3 ) или 5'-дезоксиаденозильной группой . Исторически сложилось так, что ковалентная связь углерод-кобальт является одним из первых примеров связи углерод-металл, открытых в биологии. Гидрогеназы и, при необходимости, ферменты, связанные с утилизацией кобальта, включают связи металл-углерод. Животные обладают способностью превращать цианокобаламин и гидроксокобаламин в биологически активные формы аденозилкобаламина и метилкобаламина посредством ферментативной замены циано- или гидроксильных групп.

Структуры четырех наиболее распространенных витамеров кобаламина вместе с некоторыми синонимами. Также показана структура 5'-дезоксиаденозильной группы, которая образует группу R аденозилкобаламина.

Методы анализа витамина В 12 в пищевых продуктах

Для определения содержания витамина B 12 в пищевых продуктах использовалось несколько методов, включая микробиологические анализы, хемилюминесцентные анализы, полярографические, спектрофотометрические и высокоэффективные процессы жидкостной хроматографии. Микробиологический анализ был наиболее часто используемым методом анализа пищевых продуктов с использованием определенных микроорганизмов, нуждающихся в витамине B 12 , таких как Lactobacillus delbrueckii subsp. лактис ATCC7830. Однако он больше не является эталонным методом из-за высокой неопределенности измерения витамина B 12 . Кроме того, этот анализ требует инкубации в течение ночи и может давать ложные результаты, если в пищевых продуктах присутствуют какие-либо неактивные аналоги витамина B 12 . В настоящее время для определения содержания витамина В 12 в пищевых продуктах используется анализ радиоизотопного разведения (RIDA) с меченым витамином B 12 и IF свиней (свиньи). В предыдущих отчетах предполагалось, что метод RIDA способен обнаруживать более высокие концентрации витамина B 12 в пищевых продуктах по сравнению с методом микробиологического анализа.

Биохимия

Коферментная функция

Витамин B 12 действует как кофермент , а это означает, что его присутствие необходимо в некоторых реакциях, катализируемых ферментами. Здесь перечислены три класса ферментов, которым иногда требуется B 12 для функционирования (у животных):

  1. Изомеразы
    Перегруппировки, при которых атом водорода непосредственно переносится между двумя соседними атомами с сопутствующим обменом вторым заместителем X, который может быть атомом углерода с заместителями, атомом кислорода спирта или амином. В них используется форма витамина adoB 12 (аденозилкобаламин).
  2. Метилтрансферазы
    Метильная (–CH 3 ) группа переносится между двумя молекулами. В них используется форма витамина MeB 12 (метилкобаламин).
  3. Дегалогеназы
    Некоторые виды анаэробных бактерий синтезируют B 12 -зависимые дегалогеназы, которые имеют потенциальное коммерческое применение для разложения хлорированных загрязнителей. Микроорганизмы могут либо быть способны к биосинтезу корриноидов de novo , либо зависеть от экзогенного витамина B 12 .

У человека известны два основных кофермента В 12 -зависимых семейства ферментов, соответствующих первым двум типам реакций. Они типичны для следующих двух ферментов:

Упрощенная схема цикла фолиевой кислоты и метионина. Метионинсинтаза переносит метильную группу на витамин, а затем переносит метильную группу на гомоцистеин, превращая его в метионин.

Метилмалонилкоэнзим А мутаза (МУТ) представляет собой фермент изомеразу, который использует форму AdoB 12 и тип реакции 1 для превращения L-метилмалонил-КоА в сукцинил-КоА , что является важным этапом катаболического распада некоторых аминокислот в сукцинил-КоА, который затем входит в производство энергии через цикл лимонной кислоты . Эта функциональность утрачивается при дефиците витамина B 12 и может быть измерена клинически как повышенная концентрация метилмалоновой кислоты (ММА) в сыворотке крови. Функция MUT необходима для правильного синтеза миелина . Основываясь на исследованиях на животных, считается, что повышенный уровень метилмалонил-КоА гидролизуется с образованием метилмалоната (метилмалоновой кислоты), нейротоксичной дикарбоновой кислоты, вызывающей неврологическое ухудшение.

Метионинсинтаза , кодируемая геном MTR , представляет собой фермент метилтрансферазу, который использует MeB 12 и тип реакции 2 для переноса метильной группы от 5-метилтетрагидрофолата к гомоцистеину с образованием тетрагидрофолата (ТГФ) и метионина . Эта функциональность утрачивается при дефиците витамина B 12 , что приводит к повышению уровня гомоцистеина и захвату фолиевой кислоты в виде 5-метил-тетрагидрофолата, из которого невозможно восстановить ТГФ (активная форма фолиевой кислоты). ТГФ играет важную роль в синтезе ДНК, поэтому снижение доступности ТГФ приводит к неэффективному производству клеток с быстрым оборотом, в частности эритроцитов, а также клеток кишечной стенки, которые отвечают за абсорбцию. ТГФ может быть регенерирован с помощью MTR или может быть получен из свежего фолата в рационе. Таким образом, все эффекты синтеза ДНК при дефиците B 12 , включая мегалобластную анемию пернициозной анемии , исчезают, если в рационе присутствует достаточное количество фолиевой кислоты. Таким образом, наиболее известная «функция» B 12 (та, которая связана с синтезом ДНК, делением клеток и анемией) на самом деле является факультативной функцией, опосредованной B 12 - консервированием активной формы фолиевой кислоты, необходимой для жизнедеятельности. эффективное производство ДНК. Другие кобаламин-требующие ферменты метилтрансферазы также известны у бактерий, такие как Me-H 4 -MPT, кофермент М-метилтрансфераза.

физиология

Поглощение

Пища B 12 поглощается двумя процессами. Первый представляет собой специфический для витамина B 12 кишечный механизм с использованием внутреннего фактора, благодаря которому 1-2 мкг могут всасываться каждые несколько часов, благодаря чему всасывается большая часть потребляемого с пищей витамина. Второй процесс пассивной диффузии. Человеческая физиология всасывания активного витамина B 12 из пищи сложна. Связанный с белками витамин B 12 должен высвобождаться из белков под действием пищеварительных протеаз как в желудке, так и в тонком кишечнике. Желудочная кислота высвобождает витамин из частиц пищи; поэтому антациды и блокаторы кислоты (особенно ингибиторы протонной помпы ) могут ингибировать абсорбцию B 12 . После того, как B 12 освобождается от белков пищи под действием пепсина в желудке, R-белок (также известный как гаптокоррин и транскобаламин-1), связывающий B 12 белок, который вырабатывается в слюнных железах, связывается с B 12 . Это защищает витамин от деградации в кислой среде желудка. Этот образец переноса B 12 на специальный связывающий белок, секретируемый на предыдущем этапе пищеварения, повторяется еще раз перед абсорбцией. Следующим связывающим белком для B 12 является внутренний фактор (IF), белок, синтезируемый париетальными клетками желудка , который секретируется в ответ на гистамин , гастрин и пентагастрин , а также на присутствие пищи. В двенадцатиперстной кишке протеазы расщепляют R - белки и высвобождают связанный с ними B 12 , который затем связывается с IF с образованием комплекса (IF/B 12 ). B 12 должен быть присоединен к IF для его эффективного всасывания, поскольку рецепторы на энтероцитах в терминальном отделе подвздошной кишки тонкой кишки распознают только комплекс B 12 -IF; кроме того, внутренний фактор защищает витамин от катаболизма кишечными бактериями.

Таким образом, для усвоения пищевого витамина B 12 требуется неповрежденный и функционирующий желудок , экзокринная поджелудочная железа , внутренний фактор и тонкая кишка. Проблемы с любым из этих органов делают возможным дефицит витамина B 12 . У людей с недостатком внутреннего фактора снижена способность поглощать B 12 . При пернициозной анемии наблюдается недостаток IF вследствие аутоиммунного атрофического гастрита , при котором образуются антитела против париетальных клеток. Антитела могут попеременно образовываться против IF и связываться с ним, препятствуя выполнению им защитной функции B 12 . Из-за сложности абсорбции B 12 у пожилых пациентов, у многих из которых наблюдается гипоацидность из-за сниженной функции париетальных клеток, повышен риск дефицита B 12 . Это приводит к 80-100% экскреции пероральных доз с калом по сравнению с 30-60% экскреции с калом, что наблюдается у лиц с адекватным IF.

Как только комплекс IF/B 12 распознается специализированными рецепторами подвздошной кишки , он транспортируется в портальное кровообращение . Затем витамин переносится на транскобаламин II (TC-II/B 12 ), который служит переносчиком плазмы. Наследственные дефекты продукции транскобаламинов и их рецепторов могут приводить к функциональной недостаточности B 12 и младенческой мегалобластной анемии , а также к аномальным биохимическим показателям, связанным с B 12 , даже в некоторых случаях при нормальных уровнях B 12 в крови. Чтобы витамин служил внутри клеток, комплекс TC-II/B 12 должен связываться с клеточным рецептором и подвергаться эндоцитозу . Транскобаламин II расщепляется внутри лизосомы , и свободный B 12 наконец высвобождается в цитоплазму, где он может быть преобразован в соответствующий кофермент с помощью определенных клеточных ферментов (см. выше).

Исследования кишечной абсорбции B 12 показывают, что верхний предел абсорбции на однократную пероральную дозу в нормальных условиях составляет около 1,5  мкг. Процесс пассивной диффузии абсорбции B 12 - обычно очень небольшая часть общей абсорбции витамина из пищи - может превышать абсорбцию, опосредованную R-белком и IF, когда пероральные дозы B 12 очень велики (тысяча или более мкг на доза), как это обычно бывает при пероральном приеме B 12 в виде специальных таблеток . Это позволяет лечить пернициозную анемию и некоторые другие дефекты всасывания B 12 пероральными мегадозами B 12 , даже без какой-либо коррекции лежащих в основе дефектов всасывания. См. раздел о добавках выше.

Хранение и выведение

Скорость изменения уровня B 12 зависит от баланса между тем, сколько B 12 поступает из пищи, сколько выделяется и сколько всасывается. Общее количество витамина В 12 , хранящегося в организме,  у взрослых составляет около 2–5 мг. Около 50% этого количества хранится в печени. Приблизительно 0,1% этого количества теряется в день с выделениями в кишечник, так как не все эти выделения реабсорбируются. Желчь является основной формой экскреции B 12 ; большая часть В 12 , секретируемого с желчью, рециркулирует через энтерогепатическую циркуляцию . Избыток B 12 сверх связывающей способности крови обычно выводится с мочой. Благодаря чрезвычайно эффективной энтерогепатической циркуляции В 12 печень может запасать витамин В 12 в течение 3-5 лет ; поэтому алиментарная недостаточность этого витамина у взрослых встречается редко при отсутствии нарушений мальабсорбции.

Производство

Биосинтез

Витамин B 12 происходит из тетрапиррольного структурного каркаса , созданного ферментами деаминазой и косинтетазой , которые трансформируют аминолевулиновую кислоту через порфобилиноген и гидроксиметилбилан в уропорфириноген III . Последний является первым макроциклическим интермедиатом, общим для гема , хлорофилла , сирогема и самого B 12 . Более поздние стадии, особенно включение дополнительных метильных групп в его структуру, были исследованы с использованием S-аденозилметионина , меченого 13 C метилом . Только когда был использован генно-инженерный штамм Pseudomonas denitrificans , в котором восемь генов, участвующих в биосинтезе витамина, были сверхэкспрессированы , можно было определить полную последовательность метилирования и других этапов, таким образом, полностью установив все промежуточные соединения. в пути.

Известно , что виды из следующих родов и следующих отдельных видов синтезируют B12 : Propionibacterium shermanii , Pseudomonas denitrificans , Streptomyces griseus , Acetobacterium , Aerobacter , Agrobacterium , Alcaligenes , Azotobacter , Bacillus , Clostridium , Corynebacterium , Flavobacterium , Lactobacillus , Micromonospora , Mycobacterium Nocardia , Proteus , Rhizobium , Salmonella , Serratia , Streptococcus и Xanthomonas .

промышленный

Промышленное производство B 12 достигается путем ферментации выбранных микроорганизмов. Streptomyces griseus , бактерия, которую когда-то считали грибком , в течение многих лет была коммерческим источником витамина B12 . Виды Pseudomonas denitrificans и Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii чаще используются сегодня. Их выращивают в особых условиях для повышения урожайности. Рон-Пуленк улучшила урожай с помощью генной инженерии P. denitrificans . Propionibacterium , другие широко используемые бактерии, не производят экзотоксинов или эндотоксинов и в целом признаны безопасными (получили статус GRAS ) Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Общее мировое производство витамина B 12 в 2008 году составило 35 000 кг (77 175 фунтов).

Лаборатория

Полный лабораторный синтез B 12 был осуществлен Робертом Бернсом Вудвордом и Альбертом Эшенмозером в 1972 году и остается одним из классических достижений органического синтеза, требующим усилий 91 научного сотрудника с докторской степенью (в основном в Гарварде) и 12 аспирантов (в ETH Zurich ). ) из 19 стран. Синтез представляет собой формальный полный синтез, поскольку исследовательские группы получили только известное промежуточное соединение кобировой кислоты, о химическом превращении которой в витамин B 12 сообщалось ранее. Хотя он представляет собой интеллектуальное достижение высочайшего уровня, синтез витамина B 12 Эшенмозером-Вудвордом не имеет практического значения из-за его продолжительности, состоящего из 72 химических стадий и дающего общий химический выход значительно ниже 0,01%. И хотя с 1972 года предпринимались спорадические синтетические попытки, синтез Эшенмозера-Вудворда остается единственным завершенным (формальным) полным синтезом.

История

Описание эффектов дефицита

Между 1849 и 1887 годами Томас Аддисон описал случай пернициозной анемии , Уильям Ослер и Уильям Гарднер впервые описали случай невропатии, Хайем описал большие эритроциты в периферической крови при этом состоянии, которое он назвал «гигантскими кровяными тельцами» (теперь называемыми макроциты ), Пауль Эрлих идентифицировал мегалобласты в костном мозге, а Людвиг Лихтхайм описал случай миелопатии .

Идентификация печени как продукта против анемии

В 1920-х годах Джордж Уиппл обнаружил, что употребление в пищу большого количества сырой печени , по- видимому, наиболее быстро излечивает анемию от кровопотери у собак, и выдвинул гипотезу, что употребление в пищу печени может лечить пернициозную анемию. Эдвин Кон изготовил экстракт печени, который в 50-100 раз эффективнее лечил пернициозную анемию, чем натуральные продукты печени. Уильям Кастл продемонстрировал, что желудочный сок содержит «внутренний фактор», который в сочетании с употреблением мяса приводит к абсорбции витамина в этом состоянии. В 1934 году Джордж Уиппл разделил Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1934 года с Уильямом П. Мерфи и Джорджем Майнотом за открытие эффективного лечения пернициозной анемии с использованием концентрата печени, который, как позже выяснилось, содержит большое количество витамина B 12 .

Идентификация активного соединения

Во время работы в Бюро молочной промышленности Министерства сельского хозяйства США Мэри Шоу Шорб была назначена работа над бактериальным штаммом Lactobacillus lactis Dorner (LLD), который использовался для приготовления йогурта и других кисломолочных продуктов. В качестве питательной среды для LLD требовался экстракт печени. Шорб знала, что тот же экстракт печени использовался для лечения пернициозной анемии (ее свекор умер от этой болезни), и пришла к выводу, что LLD можно разработать в качестве метода анализа для идентификации активного соединения. Во время учебы в Университете Мэриленда она получила небольшой грант от Merck и в сотрудничестве с Карлом Фолкерсом из этой компании разработала анализ LLD. Это идентифицировало «фактор LLD» как необходимый для роста бактерий. Шорб, Фолкер и Александр Р. Тодд из Кембриджского университета использовали анализ LLD для извлечения фактора противопернициозной анемии из экстрактов печени, его очистки и присвоения ему названия витамин B 12 . В 1955 году Тодд помог выяснить структуру витамина, за что был удостоен Нобелевской премии по химии в 1957 году. Полную химическую структуру молекулы определила Дороти Ходжкин на основе кристаллографических данных в 1956 году, за что за то и за другие кристаллографические анализы она была удостоена Нобелевской премии по химии в 1964 году. Ходжкин расшифровал структуру инсулина .

Пять человек были удостоены Нобелевской премии за прямые и косвенные исследования витамина B 12 : Джордж Уиппл, Джордж Майнот и Уильям Мерфи (1934), Александр Р. Тодд (1957) и Дороти Ходжкин (1964).

Коммерческое производство

Промышленное производство витамина B 12 достигается путем ферментации отобранных микроорганизмов. Как отмечалось выше, полностью синтетический лабораторный синтез B12 был осуществлен Робертом Бернсом Вудвордом и Альбертом Эшенмозером в 1972 году. Этот процесс не имеет коммерческого потенциала, поскольку требует около 70 стадий и имеет выход значительно ниже 0,01%.

Общество и культура

В 1970-х годах Джон А. Майерс, врач из Балтимора, разработал программу внутривенных инъекций витаминов и минералов при различных заболеваниях. Формула включала 1000 мкг цианокобаламина. Это стало известно как коктейль Майерс . После его смерти в 1984 году другие врачи и натуропаты начали назначать «внутривенную терапию микронутриентами» с необоснованными заявлениями о пользе для лечения усталости, упадка сил, стресса, беспокойства, мигрени, депрессии, ослабленного иммунитета, содействия снижению веса и многого другого. Однако, кроме отчета о тематических исследованиях, в научной литературе нет подтвержденных преимуществ. Медицинские работники в клиниках и на курортах прописывают варианты этих внутривенных комбинированных препаратов, а также внутримышечные инъекции только витамина B 12 . Обзор клиники Майо пришел к выводу, что нет убедительных доказательств того, что инъекции витамина B 12 обеспечивают прилив энергии или способствуют снижению веса.

Имеются данные о том, что пожилым людям врачи часто неоднократно назначают и вводят инъекции цианокобаламина ненадлежащим образом, о чем свидетельствует то, что у большинства субъектов в одном крупном исследовании либо были нормальные концентрации в сыворотке, либо они не проходили тестирование до инъекций.

Смотрите также

дальнейшее чтение

  • Герасим С., Лофгрен М., Банерджи Р. (май 2013 г.). «Навигация по дороге B (12): усвоение, доставка и нарушения кобаламина» . Дж. Биол. хим . 288 (19): 13186–93. doi : 10.1074/jbc.R113.458810 . ПВК 3650358  . PMID 23539619 . 

использованная литература

внешние ссылки