SH-SY5Y - SH-SY5Y

Клетки SH-SY5Y могут образовывать скопления недифференцированных клеток, которые затем распространяют дифференцированные клетки на окружающую область. Это образование роста можно назвать «сверхлегким образованием».

SH-SY5Y - это линия клеток человеческого происхождения, используемая в научных исследованиях. Исходная линия клеток, названная SK-N-SH, из которой она была субклонирована, была выделена из биопсии костного мозга, взятой у четырехлетней женщины с нейробластомой . Клетки SH-SY5Y часто используются в качестве моделей нейрональной функции и дифференцировки in vitro . Они являются адренергическими по фенотипу, но также экспрессируют дофаминергические маркеры и, как таковые, использовались для изучения болезни Паркинсона , нейрогенеза и других характеристик клеток мозга.

История

SH-SY5Y был клонирован из линии, полученной из биопсии костного мозга под названием SK-N-SH лабораторией Джун Бидлер и впервые описан в 1973 году . Нейробластоподобный субклон SK-N-SH, названный SH-SY, был субклонирован как SH-SY5, который был субклонирован в третий раз для получения линии SH-SY5Y, впервые описан в 1978 году. Процесс клонирования включал отбор отдельных клеток или кластеров, экспрессирующих нейроноподобные характеристики. Линия SH-SY5Y является генетически женской с двумя X-хромосомами и без Y-хромосомы, как и ожидалось, учитывая происхождение от четырехлетней девочки.

Морфология

Клетки обычно растут в тканевой культуре двумя разными способами. Некоторые из них превращаются в скопления клеток, которые плавают в среде, в то время как другие образуют скопления, которые прилипают к чашке. Клетки SH-SY5Y могут спонтанно преобразовываться между двумя фенотипами in vitro, нейробластоподобными клетками и эпителиально-подобными клетками, хотя механизмы, лежащие в основе этого процесса, не изучены. Однако считается, что клеточная линия относится к N-типу (нейрональная), учитывая ее морфологию и способность дифференцировать клетки по нейрональному клону (в отличие от субклонированной клеточной линии SH-EP S-типа, также полученной из SK -Н-Ш). Клетки с короткими шиповидными нейритоподобными отростками мигрируют из этих прикрепленных скоплений. Клетки SH-SY5Y обладают аномальной хромосомой 1, в которой имеется дополнительная копия сегмента 1q, и относятся к трисомии 1q. Известно, что клетки SH-SY5Y являются активными дофамин-бета-гидроксилазой, ацетилхолинергическими, глутаматергическими и аденозинергическими. У клеток очень разные фазы роста, показанные на окружающих изображениях. Клетки как размножаются посредством митоза, так и дифференцируются, распространяя нейриты на окружающую область. Во время деления агрегированные клетки могут настолько отличаться от дифференцированных клеток в соответствии с клеточностью опухоли по индексу Каннул (TNF, фактор некроза опухоли), что новые ученые часто ошибочно принимают одно или другое за контаминацию. Делящиеся клетки могут образовывать кластеры клеток, которые напоминают об их злокачественной природе, но некоторые методы лечения, такие как ретиноевая кислота , BDNF или TPA, могут заставить клетки дендрифицироваться и дифференцироваться. Более того, индукция ретиноевой кислотой приводит к ингибированию роста клеток и усилению продукции норадреналина из клеток SH-SY5Y.

Клетки SH-SY5Y плотные и на данном этапе считаются сливающимися. Рост невритов более выражен в нижней части фото.

СМИ и выращивание

Наиболее часто используемый коктейль для выращивания представляет собой смесь 1: 1 DMEM и среды Ham's F12 и 10% дополнительной фетальной бычьей сыворотки . DMEM обычно содержит 3,7 г / л бикарбоната натрия , 2 мМ L-глутамина, 1 мМ пирувата натрия и 0,1 мМ заменимых аминокислот . Клетки всегда выращивают при 37 градусах Цельсия с 95% воздуха и 5% углекислого газа . Рекомендуется культивировать клетки в колбах, покрытых оболочкой для адгезии клеточных культур, это поможет в дифференцировке и дендрификации нейробластомы. В целом клетки достаточно прочные и будут расти в наиболее широко используемых средах для культивирования тканей. Однако недавно было установлено, что DMEM превосходит DMEM: F12 в отношении распространения SH-SY5Y.

SH-SY5Y обладает активностью дофамин-β-гидроксилазы и может превращать дофамин в норэпинефрин. Он также образует опухоли у голых мышей примерно через 3-4 недели. Утрата нейрональных характеристик была описана с увеличением числа пассажей. Поэтому рекомендуется не использовать после 20 пассажа или проверять определенные характеристики, такие как поглощение норадреналина или нейрональные опухолевые маркеры.

использованная литература

внешние ссылки